Щелочная фосфатаза

Описание:

Щелочная фосфатаза из слизистой оболочки тонкого кишечника крупного рогатого скота (Bos taurus) представляет собой димерный гликопротеин, ассоциированный с клеточной мембраной. Фермент имеет несколько изоформ, каждая из которых содержит две N-связанные и одну или более O-связанные олигосахаридные цепи на мономер. Для каталитической активности необходимы ионы цинка (Zn²⁺), а также ионы магния (Mg²⁺) или кальция (Ca²⁺). Поставляется в виде буферного водного раствора глицерина с активностью ≥4000 DEA единиц/мг белка. Молекулярная масса мономера составляет около 70 кДа, общая молекулярная масса димера — около 140 кДа. Фермент стабилен при хранении при −20°C в указанном буфере.

Применение:

Щелочная фосфатаза широко используется для дефосфорилирования белков (например, казеина) и нуклеиновых кислот (ДНК, РНК). В молекулярной биологии её применяют для удаления 5′-фосфатных групп с концов ДНК или РНК, чтобы предотвратить самолигирование, а также для последующего мечения радиоактивным фосфатом с помощью полинуклеотидкиназы. В иммунохимии фермент конъюгируют с антителами для использования в ELISA, вестерн-блоттинге и иммуногистохимии. Благодаря высокой чувствительности, эта форма щелочной фосфатазы рекомендована для конъюгации с белками и антителами. Данный продукт применялся в скрининговых стратегиях для выделения штаммов, продуцирующих нитрилазу, а также в ультрачувствительных иммуноанализах (до 1 зептомоля). Фермент также использовался для изучения фосфорилирования белков в мембранах незрелых секреторных гранул.