Duolink In Situ Detection Reagents Brightfield

Описание:

Набор реагентов Duolink In Situ Brightfield предназначен для высокочувствительной детекции белок-белковых взаимодействий, посттрансляционных модификаций и уровня экспрессии белков на уровне одиночных молекул в фиксированных клетках и тканях. Метод основан на технике проксимального лигирования (PLA®), где два вторичных антитела, конъюгированных с олигонуклеотидами (PLA-пробы PLUS и MINUS), связываются с первичными антителами разных видов. При сближении проб образуется кольцевая ДНК-матрица, которая амплифицируется с образованием множества копий. Детекция сигнала осуществляется с помощью HRP и хромогенного субстрата (brightfield), что позволяет избежать проблем с автофлуоресценцией образца. Реагенты совместимы с различными типами образцов: фиксированные клетки, цитоспины, клетки на покровных стеклах, FFPE-срезы, свежие и замороженные ткани. Не требуется минимальное количество клеток. Набор оптимизирован для использования с коммерчески доступными первичными антителами (IgG, моно- или поликлональные), предварительно протестированными в методах IF, IHC или ICC. Для выполнения эксперимента необходимы два первичных антитела из разных видов, пара PLA-проб PLUS и MINUS, набор реагентов для детекции, промывочные буферы и среда для заключения. НПО ЭкоТек предлагает данное решение для исследовательских целей.

Применение:

Реагенты Duolink In Situ Brightfield (ранее поставлялись Sigma-Aldrich, теперь НПО ЭкоТек) предназначены для детекции белок-белковых взаимодействий методом проксимального лигирования (PLA®) с визуализацией в brightfield. Протокол включает фиксацию, блокировку, инкубацию с первичными антителами, PLA-пробами, лигирование, амплификацию и окрашивание HRP-субстратом. Образцы: фиксированные клетки, цитоспины, клетки на стеклах, парафиновые срезы (FFPE), свежие или замороженные ткани. Необходимы два первичных антитела из разных видов (IgG, моно- или поликлональные), предварительно проверенные в IF/IHC/ICC. Дополнительно требуются PLA-пробы PLUS и MINUS, промывочные буферы и среда для заключения. Реагенты подходят для задач: изучение протеин-протеиновых взаимодействий, обнаружение посттрансляционных модификаций, анализ экспрессии белков. Преимущества: чувствительность на уровне одиночных молекул, работа с автофлуоресцентными образцами, совместимость с обычными световыми микроскопами. Для получения подробной информации о протоколах и оптимизации условий обращайтесь в НПО ЭкоТек.