Лентивирусный биосенсор RFP-LC3 (ЛентиБрайт)

Описание:

Лентивирусный биосенсор RFP-LC3 (ЛентиБрайт) представляет собой готовые к использованию лентивирусные частицы, кодирующие белок LC3, слитый с красным флуоресцентным белком (RFP). Продукт предназначен для визуализации аутофагии в живых клетках, особенно в трудно трансфицируемых типах, таких как первичные клетки и стволовые клетки. Аутофагия – это деградационный путь, обеспечивающий рециклинг питательных веществ в клетках при стрессе; она играет защитную и вредоносную роль при раке, нейродегенерации и инфекциях. Белки семейства LC3 участвуют в созревании аутофагосомы. Лентивирусные частицы обеспечивают высокую эффективность трансфекции, стабильную долговременную экспрессию трансгена и низкую иммуногенность. Биосенсор позволяет наблюдать образование аутофагосом в реальном времени с помощью флуоресцентной микроскопии.

Применение:

Применение для флуоресцентной микроскопии: клетки (например, HuMSC, HeLa, HUVEC, HT1080) трансдуцируют лентивирусными частицами с MOI 20-40 в течение 24 часов. Через 48 часов инкубации клетки обрабатывают для индукции аутофагии (EBSS с ингибитором лизосом) или ингибирования (3-метиладенин). RFP-LC3 демонстрирует диффузное распределение в цитозоле в питательных условиях и точечное распределение при аутофагии. Рекомендуется анализировать экспрессию через 24-48 часов после трансфекции. Возможно замораживание инфицированных клеток для сохранения флуоресценции. Для трудно трансфицируемых линий могут потребоваться более высокие MOI. Продукт производства НПО ЭкоТек.