SUMO протеаза с биотиновой меткой

Описание:

SUMO протеазы — это ферменты, специфически расщепляющие посттрансляционную модификацию белков (ПТМ), известную как малый убиквитин-подобный модификатор (SUMO). SUMO относится к классу убиквитина и/или убиквитин-подобных белков (UBL). Данная SUMO протеаза представляет собой Ubl-специфичную протеазу 1 (Ulp1) из Saccharomyces cerevisiae. Это первый выделенный фермент данного класса. SUMO протеаза расщепляет SUMO-домен «бесшовно»: после распознавания третичной структуры убиквитин-подобного SUMO-домена она гидролизует пептидную связь в последовательности x–Gly–Gly–x после связи Gly-Gly на C-конце SUMO-домена. Помимо расщепления естественных SUMO-модифицированных белков, SUMO протеаза используется для расщепления рекомбинантных SUMO-слитых белков. SUMO-домен известен как усиливающий растворимость слитый белок, применяемый в экспрессии рекомбинантных белков. Данная рекомбинантная протеаза не содержит дополнительных аффинных меток для очистки, поэтому её можно использовать для расщепления SUMO-слитых белков, связанных с колонкой. SUMO протеаза с биотиновой меткой легко удаляется после завершения реакции.

Применение:

Продукт с биотиновой меткой предназначен для расщепления SUMO-слитых белков на колонке. Метод позволяет специфически отщеплять целевой белок от SUMO-слитого белка, связанного с колонкой: SUMO-домен остаётся на аффинной колонке (например, Ni-NTA), а целевой белок элюируется. Это преимущество перед элюцией после расщепления: устраняются примеси, используются более мягкие условия элюции, предотвращается агрегация и инактивация белка. После расщепления протеаза эффективно удаляется с помощью авидин- или стрептавидин-конъюгированных частиц. Данная SUMO протеаза с биотиновой меткой была ферментативно биотинилирована без потери протеолитической активности. Продукт не содержит дополнительных меток для очистки (например, гистидиновой или GST).