Трипсин-агароза

Описание:

Трипсин-агароза представляет собой иммобилизованный на агарозе трипсин – сериновую протеазу, выделяемую из поджелудочной железы крупного рогатого скота. Молекула трипсина состоит из двух доменов: один отвечает за активный центр и остатки триптофана, другой – за связывание 8-анилинонафталин-1-сульфоната. Иммобилизация на агарозе обеспечивает многократное использование фермента и легкость отделения от реакционной смеси. Трипсин-агароза сохраняет высокую активность и специфичность, расщепляя пептидные связи после остатков лизина и аргинина. Продукт поставляется в виде водной суспензии с буфером, стабилизирующим фермент, и может храниться при 2–8 °C. Благодаря иммобилизации трипсин-агароза устойчива к автолизу и может быть повторно использована после промывки. Производство: НПО ЭкоТек.

Применение:

Трипсин-агароза широко применяется в протеомике и биохимии для расщепления белков перед масс-спектрометрическим анализом. В типичном протоколе белок разделяют методом SDS-PAGE, вырезают полосу, проводят триптическое расщепление непосредственно в геле, а затем идентифицируют пептиды с помощью масс-спектрометрии. Такой подход позволил идентифицировать пять эндосомных белков. Кроме того, трипсин-агароза используется для изучения расщепления вирусных белков, например, при обработке белка E5 вируса папилломы человека высокого риска (HPV-16 E5) образуется уникальный С-концевой пептид из четырёх аминокислот, который служит маркером экспрессии E5 в трансфицированных клетках и эпителиальных линиях, содержащих интегрированную и эписомальную ДНК HPV-16. Также продукт пригоден для переваривания белков в растворе, фрагментации белков для структурных исследований и других задач протеомики.