Нуклеаза Benzonase (Эндонуклеаза)

Описание:

Нуклеаза Benzonase® представляет собой генно-инженерную эндонуклеазу, полученную из бактерии Serratia marcescens. Этот фермент эффективно расщепляет все формы ДНК и РНК (одноцепочечные, двуцепочечные, линейные и кольцевые), не обладая при этом протеолитической активностью. Нуклеаза Benzonase отличается широким диапазоном рабочих условий и исключительно высокой удельной активностью. Фермент полностью переваривает нуклеиновые кислоты до олигонуклеотидов длиной от 2 до 5 оснований, оканчивающихся 5′-монофосфатом (ниже предела гибридизации), что идеально подходит для удаления нуклеиновых кислот из рекомбинантных белков и обеспечивает соответствие требованиям FDA по допустимому уровню их контаминации. Способность Benzonase быстро гидролизовать нуклеиновые кислоты делает её отличным выбором для снижения вязкости растворов, что сокращает время обработки и увеличивает выход целевого белка. Например, фермент совместим с реагентами для экстракции белка от НПО ЭкоТек и может добавляться вместе с ними для устранения вязкости и удаления нуклеиновых кислот из экстрактов E. coli. Фермент состоит из двух субъединиц по 30 кДа каждая. Он активен в диапазоне pH от 6 до 10 и при температурах от 0 до 42°C, для активации требует 1-2 мМ ионов магния (Mg²⁺). Нуклеаза также активна в присутствии ионных и неионных детергентов, восстановителей, PMSF (1 мМ), ЭДТА (1 мМ) и мочевины (относительная активность зависит от конкретных условий). Активность ингибируется при концентрациях >150 мМ одновалентных катионов, >100 мМ фосфата, >100 мМ сульфата аммония или >100 мМ гидрохлорида гуанидина. Нуклеаза Benzonase поставляется в ультрачистой (>99% по данным SDS-PAGE) и чистой (>90%) степенях очистки со стандартной концентрацией 25-29 Ед/мкл и в высококонцентрированной форме (HC) 250 Ед/мкл. Оба препарата не содержат детектируемых протеаз и имеют удельную активность >1×10⁶ Ед/мг белка. Препарат чистотой >99% тестируется на эндотоксины и содержит <0.25 ЕЭ/1000 единиц активности. Продукт поставляется в 50% глицерине. Хранить при -20°C. Общий уровень эндотоксинов: 90% по данным SDS-PAGE.

Применение:

Применяется для удаления нуклеиновых кислот из белковых образцов. Используется в биохимических и молекулярно-биологических исследованиях для очистки рекомбинантных белков, снижения вязкости клеточных лизатов, подготовки образцов для хроматографии и электрофореза, а также для обеспечения соответствия нормативным требованиям по содержанию нуклеиновых кислот в фармацевтических препаратах.