Дезоксирибонуклеаза I

Описание:

Дезоксирибонуклеаза I (ДНКаза I, КФ 3.1.21.1) — эндонуклеаза, гидролизующая двухцепочечную и одноцепочечную ДНК с образованием 5′-фосфорилированных олигонуклеотидов. Фермент выделен из поджелудочной железы быка. Поставляется в виде лиофилизированного порошка (Тип II) с содержанием белка ≥80% и удельной активностью ≥2000 ед/мг белка (CAS 9003-98-9). Для активности требуется присутствие ионов Mg2+ или Mn2+; оптимальный pH 7–8. Фермент ингибируется EDTA и актиномицином D. Широко применяется в молекулярной биологии для удаления ДНК из белковых образцов, введения разрывов (ников) в ДНК (например, в реакции ник-трансляции для включения меченых нуклеотидов), в анализе структуры хроматина (например, в методе DNase I footprinting), а также в составе нуклеазной смеси с РНКазой при подготовке клеточных лизатов. Используется для экстракции РНК из вирусных препаратов. Рекомендуемые условия хранения: -20°C. Продукт произведен НПО ЭкоТек и предназначен для научно-исследовательских целей.

Применение:

ДНКаза I используется для внесения разрывов в ДНК (никования) как первый этап введения меченых оснований в ДНК. Фермент от НПО ЭкоТек применялся в составе нуклеазного стока вместе с РНКазой при приготовлении клеточных лизатов линий MDCK II. Также использовался при экстракции РНК из вируса Синдбис. Дезоксирибонуклеаза I из поджелудочной железы быка применялась для идентификации, локализации и экспрессии двух новых генов человека, гомологичных ДНКазе I. Также использовалась в исследовании нового подхода к получению высокоактивных РНКазы, ДНКазы, холестеролэстеразы и трипсина из поджелудочной железы крупного рогатого скота. Применяется для удаления ДНК из белковых образцов.