Пероксидаза из хрена

Описание:

Пероксидаза из хрена (HRP) выделяется из корней хрена (Amoracia rusticana) и относится к группе ферропротопорфириновых пероксидаз. HRP представляет собой одноцепочечный полипептид, содержащий четыре дисульфидных мостика. Это гликопротеин с содержанием углеводов 18%. Углеводный состав включает галактозу, арабинозу, ксилозу, фукозу, маннозу, маннозамин и галактозамин в зависимости от изофермента. Молекулярная масса (~44 кДа) складывается из полипептидной цепи (33 890 Да), гемина и Ca2+ (~700 Да) и углеводов (~9400 Да). Существует не менее семи изоферментов HRP. Изоэлектрическая точка изоферментов пероксидазы хрена варьируется от 3,0 до 9,0. Физически представляет собой лиофилизированный порошок светло-коричневого цвета, хорошо растворимый в воде и буферных растворах. Фермент стабилен в диапазоне pH 5,0-9,0, оптимальная активность при pH около 7,0. Катализирует реакцию восстановления пероксида водорода: H2O2 + AH2 → 2H2O + A, где AH2 — донор электронов (например, TMB, ABTS, DAB). HRP широко используется в иммуноферментном анализе (ELISA), вестерн-блоттинге, иммуногистохимии, а также в биосенсорах и химиолюминесцентных методах. Является первым ферментом, применённым в электрохимических иммуносенсорах.

Применение:

Пероксидаза из хрена (HRP) широко применяется в биохимических методах, таких как вестерн-блоттинг, ELISA и иммуногистохимия. Фермент используется для усиления слабого сигнала и повышения обнаруживаемости целевых молекул (например, белков). Продукция НПО ЭкоТек применялась для изучения неоральных антигенов в воспалённой десне и токсичности гликопротеина вируса Эбола. HRP также использовалась в качестве сравнения при анализе пероксидазной активности экстрактов листьев овсяницы, а также для измерения продукции H2O2. Дополнительно HRP применяется в конъюгатах с антителами для иммуноферментного анализа, в биосенсорах для детекции глюкозы, холестерина и других аналитов, а также в методах усиленной хемилюминесценции. Фермент может быть использован в комбинации с люминолом для высокочувствительного обнаружения перекиси водорода. Благодаря высокой стабильности и активности, HRP остаётся одним из наиболее популярных репортёрных ферментов в молекулярной биологии и диагностике.