Диспаза I, протеаза из Bacillus polymyxa, лиофилизированный порошок

Описание:

Диспаза I (CAS 42613-33-2) — нейтральная протеаза, полученная из Bacillus polymyxa. Фермент гидролизует N-концевые пептидные связи неполярных аминокислотных остатков, преимущественно атакуя денатурированные и межклеточные белки с экспонированными гидрофобными остатками. Диспаза I расщепляет фибронектин и коллаген IV типа, но не ламинин, коллаген V типа, сывороточный альбумин или трансферрин. Активность фермента активируется ионами Ca2+, Mg2+, Mn2+, Fe2+, Fe3+ и Al3+, ингибируется EDTA, EGTA, Hg2+ и другими тяжелыми металлами. Фермент содержит 1 г-атом цинка на г-моль очищенного фермента; удаление цинка хелатирующими агентами приводит к образованию неактивного апофермента. Диспаза I не ингибируется сывороткой. Поставляется в виде лиофилизированного порошка. Одна единица гидролизует казеин с образованием цвета, эквивалентного 1,0 мкмоль (181 мкг) тирозина в минуту при pH 7,5 и 37 °C (по методу Фолина–Чокальтеу), если не указано иное. Диспаза является зарегистрированным товарным знаком Godo Shusei Co., Ltd.

Применение:

Диспаза I применяется для ферментативного разделения тканей: используется при переваривании легких для проточной цитометрии и выделения CD4-клеток у мышей, для переваривания ран и окружающей кожи с целью детекции GFP+ клеток, для отделения эпидермиса при выделении дермальных фибробластов, а также для получения суспензии одиночных клеток для секвенирования. Фермент также применялся в исследованиях влияния амниотической мембраны на размер раны и в анализе протеазной активности с использованием дитирозинового субстрата.