Диспаза II (протеаза из Bacillus polymyxa), CAS 42613-33-2

Описание:

Диспаза II (протеаза из Bacillus polymyxa) представляет собой нейтральную протеазу, которая гидролизует N-концевые пептидные связи неполярных аминокислотных остатков. Фермент отличается мягким действием и не повреждает клеточные мембраны, что позволяет использовать его для разделения тканей и клеток, выращенных in vitro, а также для предотвращения слипания клеток в суспензионных культурах. Диспаза II расщепляет фибронектин и коллаген IV типа, но не расщепляет ламинин, коллаген V типа, сывороточный альбумин или трансферрин. Фермент специфичен к расщеплению связей лейцин-фенилаланин. Активность фермента активируется ионами Ca2+, Mg2+, Mn2+, Fe2+, Fe3+ и Al3+, а ингибируется EDTA, EGTA, Hg2+ и другими тяжелыми металлами. Фермент содержит 1 г-атом цинка на г-моль очищенного фермента; удаление цинка хелатирующими агентами приводит к образованию неактивного апопротеина. Сыворотка не ингибирует фермент. Физическая форма: лиофилизированный порошок, содержащий ацетат кальция и молочный сахар. Одна единица гидролизует казеин с образованием цвета, эквивалентного 1,0 мкмоль (181 мкг) тирозина в минуту при pH 7,5 и 37 °C (цвет по реагенту Фолина-Чокальтеу), если не указано иное. Диспаза является зарегистрированным товарным знаком Godo Shusei Co., Ltd.

Применение:

Фермент применяли для разработки протокола экс-виво культуры эмбриональных молочных желез мыши (PMID 23674216), при выделении митохондрий из сердца крысы (PMID 22174647), для выделения стволовых клеток пульпы зуба (DPSCs) ферментативным гидролизом (PMID 23715720), для флуоресцентно-активированной клеточной сортировки (FACS) (PMID 21337465) и для разделения слоев висцерального желточного мешка (PMID 21354127). Подходит для получения суспензии отдельных клеток для секвенирования.