Описание:
Линия ES-R1-EGFP B5/EGFP представляет собой плюрипотентную линию эмбриональных стволовых клеток мыши, экспрессирующую зеленый флуоресцентный белок (GFP). Вариант получен путем случайной интеграции трансгенов EGFP в клетки ES-R1 (НПО ЭкоТек 07072001) с использованием коэлектропорации с циркулярным селектируемым маркерным вектором, содержащим pPGK Puro. Экспрессия трансгена управляется энхансером CMV immediate early, связанным с бета-актиновым промотором курицы и первым интроном. Для поддержания клеток в недифференцированном состоянии требуются митотически инактивированные фидерные клетки, например, мышиные эмбриональные фибробласты, STO (НПО ЭкоТек 86032003) или SNL 76/7 (НПО ЭкоТек 07032801). При работе с культурой пластиковую посуду предварительно покрывают желатином (0,1% раствор, НПО ЭкоТек G1890) перед высаживанием фидерных клеток. Клетки ES высаживают с плотностью 4–5 x 10^4 клеток/см², культивируют при 37 °C в увлажненной атмосфере с 5% CO2, ежедневно заменяют среду и пассируют каждые 2–3 дня, не допуская соприкосновения колоний. Доступны варианты: клеточная линия (код -1VL или VIAL) и ДНК из клеточной линии (код -DNA-5UG).
Применение:
Линия предназначена для исследовательских целей в области биологии стволовых клеток, изучения плюрипотентности и дифференцировки. Экспрессия GFP позволяет визуализировать клетки в культуре и отслеживать их in vitro. ДНК из клеточной линии может использоваться для молекулярно-биологических исследований.







