Описание:
Линия ES-R1-EGFP D4/XEGFP представляет собой плюрипотентную линию эмбриональных стволовых клеток мыши, экспрессирующую зеленый флуоресцентный белок (GFP). Этот вариант был получен путем случайной интеграции трансгенов EGFP в клетки ES-R1 (каталожный номер НПО ЭкоТек 07072001) с использованием коэлектропорации с циркулярным вектором, содержащим селективный маркер pPGK Puro. Вектор находится под контролем энхансера раннего немедленного ответа цитомегаловируса, соединенного с куриным бета-актиновым промотором и первым интроном. Для поддержания клеток в недифференцированном состоянии требуются митотически инактивированные фидерные клетки, например, мышиные эмбриональные фибробласты, STO (НПО ЭкоТек 86032003) или SNL 76/7 (НПО ЭкоТек 07032801). При работе с культурой рекомендуется предварительно покрывать пластиковую посуду желатином (0,1% раствор, НПО ЭкоТек G1890) перед высаживанием фидерных клеток. Клетки следует культивировать при 37 °C во влажной атмосфере с 5% CO2, ежедневно менять среду и пассировать каждые 2–3 дня, не допуская соприкосновения колоний. Для данного продукта доступны как клеточная линия (вариант -1VL), так и ДНК из клеточной линии (вариант -DNA-5UG).
Применение:
Линия ES-R1-EGFP D4/XEGFP предназначена для исследований в области биологии стволовых клеток, в частности для изучения плюрипотентности и дифференцировки. Благодаря экспрессии GFP она может использоваться в качестве репортерной линии для визуализации клеток в экспериментах по траснплантации или in vitro. Также может применяться для получения дифференцированных производных с флуоресцентной меткой.






