Набор для оценки роста клеток MTT (колориметрический анализ)

Описание:

MTT (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия бромид) — бледно-желтый субстрат, который расщепляется живыми клетками с образованием темно-синего формазана. Процесс требует активных митохондрий; даже свежепогибшие клетки не расщепляют значительные количества MTT. Колориметрический анализ может использоваться для оценки пролиферации или комплемент-опосредованной цитотоксичности. В набор входят реагент A (MTT, 50 мг/флакон) и раствор B (PBS, pH 7,4, 60 мл). Для приготовления рабочего раствора к одному флакону реагента A добавляют 10 мл раствора B, тщательно перемешивают, стерильно фильтруют и хранят в темноте при 4 °C. Раствор может растворяться в течение ночи; не нагревать. Смесь A/B стабильна при 2–8 °C до двух недель. Хранить набор при 2–8 °C до шести месяцев.

Применение:

Анализ MTT применяется для оценки пролиферации клеток и комплемент-опосредованной цитотоксичности. Процедура включает проведение лимфокин-, митоген- или комплемент-опосредованного цитотоксического анализа в 96-луночных планшетах, добавление раствора MTT, инкубацию при 37 °C в течение 4 часов, затем добавление изопропанола с 0,04 Н HCl и измерение оптической плотности при 570 нм с референс-длиной волны 630 нм. Анализ позволяет детектировать от 200 до 50 000 клеток типичной клеточной линии, при этом полезный диапазон составляет 1 000–50 000 клеток.