Рибонуклеаза A

Описание:

Рибонуклеаза A (RNase A) — эндорибонуклеаза, гидролизующая фосфодиэфирные связи одноцепочечной РНК после пиримидиновых нуклеотидов. Фермент атакует 3′-фосфатный конец, образуя циклические 2′,3′-фосфатные промежуточные продукты, которые затем гидролизуются до 3′-фосфатов. RNase A представляет собой одноцепочечный полипептид с молекулярной массой около 13.7 кДа, содержащий 124 аминокислотных остатка и 4 дисульфидных мостика. Максимальную активность проявляет в отношении одноцепочечной РНК. В отличие от RNase B, не является гликопротеином. ДНК не гидролизуется из-за отсутствия 2′-OH групп. Активируется ионами калия и натрия, ингибируется ионами тяжелых металлов и алкилированием остатков His12 и His119. Фермент устойчив к денатурации и широко используется в молекулярной биологии.

Применение:

РНКаза A применяется для удаления РНК из препаратов плазмидной и геномной ДНК, а также из образцов белков. Используется в анализе последовательностей РНК, защитных анализах (RNase protection assays), для удаления неспецифически связанной РНК, гидролиза РНК в белковых образцах и очистки ДНК. Также применяется в компьютерном дизайне лекарств и картировании РНК. Фермент незаменим в лабораторных исследованиях благодаря высокой специфичности и стабильности. Поддерживает очистку ДНК и анализ структуры РНК. Инактивируется в присутствии ионов тяжелых металлов, конкурентно ингибируется ДНК.