Описание:
Рибонуклеаза A (РНКаза A) — эндорибонуклеаза, специфично расщепляющая фосфодиэфирные связи одноцепочечной РНК после пиримидиновых нуклеотидов (урацил или цитозин). Фермент представляет собой одноцепочечный полипептид с молекулярной массой около 13.7 кДа, содержащий 4 дисульфидных мостика. В отличие от РНКазы B, не является гликопротеином. РНКаза A не гидролизует ДНК из-за отсутствия 2′-OH групп. Оптимальная активность проявляется при pH 7.5, активируется ионами калия и натрия, ингибируется ионами тяжелых металлов и конкурентно ингибируется ДНК. Фермент широко используется в молекулярной биологии для удаления РНК из препаратов ДНК и белковых образцов. РНКаза A стабильна в широком диапазоне условий и является одной из наиболее изученных рибонуклеаз.
Применение:
Рибонуклеаза A применяется для удаления РНК из препаратов плазмидной и геномной ДНК, а также из белковых образцов. Используется в анализе последовательностей РНК, защитных анализах (RNase protection assay) и для гидролиза неспецифически связанной РНК. Фермент служит инструментом в компьютерном дизайне лекарств и в исследованиях структуры и функции рибонуклеаз. Применяется в катионообменной хроматографии белков и для изучения гибридазной активности. Благодаря высокой специфичности и стабильности, РНКаза A является стандартным реагентом в биохимических и молекулярно-биологических лабораториях.



