Термолизин из Geobacillus stearothermophilus

Описание:

Термолизин – термостабильная металлоэндопептидаза, выделенная из термофильной бактерии Geobacillus stearothermophilus. Фермент содержит четыре иона кальция, а также ионы цинка и кальция в качестве кофакторов. Проявляет высокую стабильность в диапазоне pH 5–9,5 и оптимальную активность при pH 8,0 и температуре 70 °C. Широко используется в протеомике для получения пептидных фрагментов, пригодных для секвенирования.

Применение:

Термолизин – термостабильная внеклеточная металлоэндопептидаза, содержащая четыре иона кальция. Кофакторы: цинк и кальций. Гидролизует белковые связи с N-концевой стороны гидрофобных аминокислотных остатков. Оптимум pH – 8,0, оптимальная температура – 70 °C. Стабилен в диапазоне pH от 5 до 9,5. Обладает низкой специфичностью расщепления, что позволяет получать множество коротких фрагментов, подходящих для секвенирования. Предпочтительное расщепление: X-разрыв-Y-Z, где X – любая аминокислота; Y – Leu, Phe, Ile, Val, Met, Ala; Z – любая аминокислота, кроме Pro. Расщепление с N-конца от Leu предпочтительнее, чем от Phe, которое предпочтительнее остальных. Часто используется для ограниченного протеолиза в пептидном картировании и изучении структуры белка и конформационных изменений.