ЛентиБрайт Паксиллин-GFP лентивирусный биосенсор

Описание:

Лентивирусный биосенсор LentiBrite Паксиллин-GFP от НПО ЭкоТек предназначен для визуализации динамики фокальных контактов в живых клетках. Паксиллин является ключевым белком, участвующим в сборке и разборке фокальных контактов, и его слияние с GFP обеспечивает яркую флуоресценцию и точную локализацию. Преимущества: высокая эффективность трансфекции делящихся и неделящихся клеток, включая первичные и труднотрансфицируемые линии; длительная стабильная экспрессия; низкая иммуногенность. Биосенсор идеально подходит для анализа клеточной адгезии, миграции и передачи сигналов в режиме реального времени.

Применение:

Для флуоресцентной микроскопии: клетки U2OS трансдуцируют лентивирусными частицами при MOI 5 в течение 24 ч, затем заменяют среду и инкубируют 48 ч. После фиксации формальдегидом и монтирования получают изображения методом широкопольной флуоресцентной микроскопии с масляной иммерсией. Паксиллин-GFP демонстрирует точечное распределение в фокальных контактах. Для иммуноцитохимического сравнения: клетки HeLa трансдуцируют при MOI 40 в течение 24 ч, затем заменяют среду и инкубируют 48 ч. Окрашивание моноклональными антителами против паксиллина (кат. № 05-417) подтверждает ко-локализацию с GFP. Для труднотрансфицируемых типов клеток (HUVEC, HuMSC) используют MOI 20 и 5 соответственно. Рекомендуется анализировать экспрессию через 24–48 ч после трансфекции для оптимальной яркости. Инфицированные клетки можно замораживать и размораживать для сохранения экспрессии.