Энтерокиназа (из бычьего кишечника)

Описание:

Энтерокиназа (также известна как энтеропептидаза) — трансмембранный белок, выделенный из бычьего кишечника. Состоит из тяжелой и легкой цепей, соединенных дисульфидной связью. N-концевая последовательность бычьей энтеропептидазы гомологична трипсиноподобным сериновым протеазам. Фермент обладает высокой субстратной специфичностью и широко используется для удаления аффинных меток (FLAG-пептид, His-метка, S-метка) с рекомбинантных белков. Узнает последовательность Asp-Asp-Asp-Asp-Lys и расщепляет после лизина. В естественных условиях активирует трипсиноген в трипсин. Препарат — лиофилизированный порошок, растворим в воде. Молекулярная масса около 150 кДа, оптимум pH 7.0–8.0, требует ионов Ca²⁺. Хранить при -20°C. Применяется в биотехнологии и структурной биологии для получения нативных белков.

Применение:

Энтерокиназа из бычьего кишечника применяется для сайт-специфического расщепления рекомбинантных слитых белков, содержащих сайт узнавания энтерокиназы (DDDDK). Используется для удаления S-метки и N-концевой His-метки с рекомбинантной глутатионпероксидазы 1 (Gpx1), а также для расщепления интерлейкина-2 (IL-2). В организме активирует трипсин из трипсиногена. Фермент семейства S1 пептидаз. Применяется в лабораторной практике для очистки белков от аффинных меток после экспрессии.