Пироглутамат-аминопептидаза из Pyrococcus furiosus

Описание:

Пироглутамат-аминопептидаза из Pyrococcus furiosus (также известная как деблокирующая аминопептидаза) представляет собой белок с молекулярной массой 42 кДа, относящийся к семейству аминопептидаз A. Фермент проявляет высокую гомологию с аминопептидазами в активном центре, содержащем консервативные остатки, связывающие цинк и кобальт. Белок является рекомбинантным, экспрессированным в Escherichia coli, и отличается термостабильностью, что делает его пригодным для использования в жестких условиях реакции. Фермент катализирует гидролиз N-концевой пироглутаминовой кислоты (пироглутамат, pGlu) из пептидов и белков, что особенно важно для подготовки образцов к анализу методом Эдмана.

Применение:

Термостабильная аминопептидаза, которая отщепляет N-концевую пироглутаминовую кислоту от белков и пептидов перед расщеплением по Эдману. Фермент используется для удаления N-концевого блокирующего пироглутаматного остатка в восстановительных условиях, что необходимо для N-концевого секвенирования очищенных белков, например кассииколина. Рекомбинантная пироглутамат-аминопептидаза из Pyrococcus furiosus, экспрессированная в E. coli, имеет активность ≥5,0 ед./мг белка и чистоту ~90% по данным SDS-PAGE. Применяется в протеомике для снятия блокировки N-концевых последовательностей, позволяя проводить анализ аминокислотной последовательности. Фермент сохраняет активность при высоких температурах, что расширяет его применимость в различных биохимических методах.