5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозид (X-Gal)

Описание:

5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозид, широко известный как X-Gal, представляет собой хромогенный субстрат для β-галактозидазы. При гидролизе ферментом образуется нерастворимый синий пигмент (5,5′-дибром-4,4′-дихлориндиго), который легко визуализируется. Это свойство делает X-Gal незаменимым инструментом в молекулярной биологии для сине-белой селекции рекомбинантных бактериальных колоний с генотипом lac+. Физически представляет собой белый или слегка желтоватый порошок или таблетки, растворимые в ДМФА и ДМСО, умеренно растворимые в воде. Хранить при -20°C в защищенном от света месте. Продукт поставляется НПО ЭкоТек и используется в гистохимии, микробиологии и молекулярной биологии.

Применение:

X-Gal является хромогенным субстратом для β-галактозидазы, который образует насыщенный синий цвет, легко обнаруживаемый визуально даже на фоне. Это субстрат выбора для сине-белой селекции рекомбинантных бактериальных колоний с генотипом lac+. Для применения готовят сток-раствор X-Gal (обычно 20-40 мг/мл в ДМФА) и добавляют в LB-агар с IPTG до конечной концентрации 40-80 мкг/мл. После инкубации колонии, несущие функциональный lacZ, окрашиваются в синий цвет, а рекомбинантные (с нарушенным lacZ) остаются белыми. Также используется для гистохимического выявления β-галактозидазы в тканях и клетках. Продукт доступен в НПО ЭкоТек в удобной форме таблеток, что упрощает приготовление сред.